PFU法,即“空斑形成单位”法(Plaque Forming Unit),是一种常用于微生物学中计数活菌的方法。以下是PFU法的原理:
1. 原理概述:
PFU法利用微生物在固体培养基上生长时,能够形成肉眼可见的空斑(即菌落)这一特性来计数活菌。通过统计这些空斑的数量,可以推算出样品中的活菌数量。
2. 具体步骤:
制备菌悬液:将待测样品与适当的稀释液混合,制备成不同浓度的菌悬液。
接种:将菌悬液均匀涂布在含有营养物质的固体培养基表面。
培养:将涂布好的培养基在适宜的温度和湿度条件下培养一段时间,使微生物生长并形成菌落。
观察和计数:当菌落生长到一定大小,肉眼可见时,计算每个平板上的空斑数量。
3. 计算活菌数量:
假设样品的稀释倍数为D,每个平板上的空斑数量为N。
则样品中的活菌数量为:N × D。
如果使用多个平板,取平均值。
4. 注意事项:
稀释倍数要适当,以确保每个平板上的空斑数量在30-300之间。
培养条件要适宜,以保证微生物的正常生长。
平板计数时要避免人为误差。
PFU法是一种常用的微生物计数方法,具有操作简便、结果准确等优点,广泛应用于微生物学、食品安全、环境保护等领域。